高通量96孔板植物基因组DNA提取试剂盒

产品货号：

WH0153

中文名称：

高通量96孔板植物基因组DNA提取试剂盒

英文名称：

96wells Plant Genomic DNA Extraction Kit

产品规格：

2×96孔

发货周期：

1～3天

产品价格：

询价

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附板和独特的缓冲液系统，用于提取植物细胞中的基因组DNA。离心吸附板中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA，可最大限度去除植物细胞中杂质蛋白及其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、qPCR文库构建、Southern杂交等实验。

产品特点

操作便捷：90分钟内即可获得高品质基因组DNA。
普适性广：特别适合于富含多糖多酚植物和植物干粉。
产物纯度高，质量好：纯化过的基因组DNA可直接用作PCR模板、酶切、杂交等分子生物学实验。
自动化：可配合大部分核酸自动纯化仪。

组分	规格
缓冲液GP1	160mL
缓冲液GP2	160mL
缓冲液GD	52mL
漂洗液PW	50mL
洗脱缓冲液TE	60mL
半裙边96孔吸附板CB3	2块
96孔深孔板	6块
封口膜	12张

保存：室温（15～25℃）干燥条件下可保存12个月；更长时间的保存可置于2～8℃。在2～8℃保存条件下，若产生沉淀，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10分钟，以溶解沉淀。

注意事项

样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小、提取量也下降。
若缓冲液GP1和GP2中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，并摇匀后使用。
所有的离心步骤均为使用台式离心机在室温下进行。
产品采用硅基质膜吸附方法纯化核酸，所需的离心机转子内部高度需要>7.4cm，能满足吸附板和深孔板同时离心。
不同来源的植物组织材料中提取的DNA的量会有差异，100mg植物组织可提取3～30μg DNA。

使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

取植物新鲜组织约100mg或干重组织约30mg，加入液氮充分研磨。
将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700μL 65℃预热缓冲液GP1的离心管中（实验前在预热的GP1中加入巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒混匀后，将离心管放在65℃水浴20min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
加入700μL氯仿，充分混匀，12000rpm （~13400×g)离心5min。
注：若提取富含多酚或淀粉的植物组织，可在第3步前，用酚:氯仿/1:1进行等体积抽提。
小心地将上一步所得上层水相转入一个96孔深孔板中，加入700μL缓冲液GP2，充分混匀。
将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个96孔吸附板CB3中（吸附板已放置在96孔深孔板上），3600rpm（~2130×g)离心5min，倒掉废液，吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
向96孔吸附板CB3中加入600μL漂洗液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），3600rpm（~2130×g)离心5min，倒掉废液，将96孔吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
向吸附板CB3中加入600μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），3600rpm（~2130×g)离心5min，倒掉废液，将96孔吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
向吸附板CB3中加入600μL漂洗液PW，3600rpm（~2130×g)离心5min，倒掉废液。
注意：如果吸附板膜呈现绿色，向吸附板CB3中加入500μL无水乙醇，3600rpm（~2130×g)离心5min，倒掉废液，将吸附板CB3放回96孔深孔板。
将96孔吸附板CB3放回96孔深孔板中，3600rpm（~2130×g)离心5min，倒掉废液。将96孔吸附板CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将96孔吸附板中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
将96孔吸附板CB3转入一个干净的96孔深孔板中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液TE，室温放置2～5min，3600rpm（~2130×g)离心8min，将溶液收集到96孔深孔板中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将收集得到的溶液再加入吸附板CB3中，室温放置2min，3600rpm （~2130×g)离心5～8min。

DNA浓度及纯度检测：

得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
DNA应在OD₂₆₀处有显著吸收峰，OD₂₆₀值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。
OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

产品目录